HRP直接标记和检测试剂盒
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用途:适用于Southern或Northern杂交实验。 特点:从没有标记的探针到化学发光检测完成,只要2小时。 标记探针只需一步,15分钟,并可以存放一年。 使用者只需要有核酸片段(DNA,RNA或寡核苷酸长度>50bp)和超纯水就可以完成实验 |
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图1,卓越的灵敏度 |
图2,探针标记的操作步骤 |
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Hind III消化的酵母基因组DNA(0.8~0.1ug/lane)分别与用North2South@ HRP(A)和放射性同位素(B)标记的探针进行Southern杂交结果比较 A.5ng/ml HRP-TCM1(PCR)探针,曝光1分钟 B.3ng/ml(2.8uCi/ml)同位素标记探针,曝光24小时 |
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简介:试剂盒的使用方法 |
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1.探针标记如上图2示 |
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2.杂交(a-d中,温度及浓度要求:RNA
65°C 4ng/ml,DNA或Oligo
55°C 8ng/ml) |
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a 等体积混匀hybridization
buffer1和2,加热到适当温度 |
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b 加到盛有已转的膜的容器里,孵育15分钟 |
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c 加入HRP标记的探针,孵育1小时 |
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d 用40ml2×SSC,0.1%SDS洗3×5分钟在55或65°C |
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e 用40ml2×SSC,室温洗3×5分钟 |
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f 等体积混匀SuperSignal
Reagent,加入盛膜的容器里,孵育5分钟 |
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g 压片曝光或用CCD相机暗室拍摄 |
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